抗原ELISA試劑盒采用雙抗原一步夾心法酶聯免疫吸附試驗(ELISA)。往預先包被病毒性腹瀉病毒抗體的包被微孔中，依次加入標本、HRP標記的檢測抗原，經過溫育并洗滌。用底物TMB顯色，TMB在過氧化物酶的催化下轉化成藍色，并在酸的作用下轉化成終的黃色。用酶標儀在450NM波長下測定吸光度(OD值)，與CUTOFF值相比較，從而判定標本中豬病毒性腹瀉病毒(BVDV)的存在與否。

　　ELISA可用于測定抗原，也可用于測定抗體。

　　在這種測定方法中有3種必要的試劑：

　　①固相的抗原或抗體，

　　②酶標記的抗原或抗體，

　　③酶作用的底物。根據試劑的來源和標本的性狀以及檢測的具備條件，可設計出各種不同類型的檢測方法。

　　抗原ELISA試劑盒的用途：ELISA的基礎是抗原或抗體的固相化及抗原或抗體的酶標記。結合在固相載體表面的抗原或抗體仍保持其免疫學活性，酶標記的抗原或抗體既保留其免疫學活性，又保留酶的活性。在測定時，受檢標本(測定其中的抗體或抗原)與固相載體表面的抗原或抗體起反應。用洗滌的方法使固相載體上形成的抗原抗體復合物與液體中的其他物質分開。再加入酶標記的抗原或抗體，也通過反應而結合在固相載體上。此時固相上的酶量與標本中受檢物質的量呈一定的比例。加入酶反應的底物后，底物被酶催化成為有色產物，產物的量與標本中受檢物質的量直接相關，故可根據呈色的深淺進行定性或定量分析。由于酶的催化效率很高，間接地放大了免疫反應的結果，使測定方法達到很高的敏感度。ELISA可用于測定抗原，也可用于測定抗體。然而，影響Elisa試驗結果的因素很多，故加強各個環節的質量保證才能充分發揮其方法學的優點。